Evaluation of Pro-Inflammatory Cytokines Expression in Mouse Splenocytes After Co-Incubation with the Biofield Energy Treated Formulation: Impact of the Trivedi Effect®

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Biomedical
Science
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Evaluation of Pro-Inflammatory Cytokines Expression in
Mouse Splenocytes After Co-Incubation with the Biofield
Energy Treated Formulation: Impact of the Trivedi Effect
®
Mahendra Kumar Trivedi
1
, Alice Branton
1
, Dahryn Trivedi
1
, Gopal Nayak
1
, Michael Peter Ellis
1
,
James Jeffery Peoples
1
, James Joseph Meuer
1
, Johanne Dodon
1
, John Lawrence Griffin
1
,
John Suzuki
1
, Joseph Michael Foty
1
, Judy Weber
1
, Julia Grace McCammon
1
, Karen Brynes Allen
1
,
Kathryn Regina Sweas
1
, Lezley Jo-Anne Wright
1
, Lisa A. Knoll
1
, Madeline E. Michaels
1
,
Margaret Kweya Wahl
1
, Mark E. Stutheit
1
, Michelle Barnard
1
, Muriel Mae Ranger
1
,
Paromvong Sinbandhit
1
, V. J. Kris Elig
1
, Sambhu Charan Mondal
2
, Snehasis Jana
2, *
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1. Introduction
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2. Materials and Methods
2.1. Chemicals and Reagent
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2.2. Test Formulation and Reference Standard
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2.3. Experimental Animal
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2.4. Biofield Energy Healing Strategies
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2.5. Experimental Design
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2.6. Isolation of Mouse Splenocytes
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2.7. Cell Culture and Test Formulation Treatment
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2.8. Cytotoxicity by MTT Assay
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2.9. Determination of Cytokines (TNF-α, IFN-γ, and IL-1β)
and Chemokine (MIP-1α) Using ELISA
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2.10. Statistical Analysis
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3. Results
3.1. In vitro Splenocyte Cells Viability by MTT Assay
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Figure 1. MTT assay in splenocyte cells after 48 hours of treatment with various concentrations of the test formulation in the presence of 0.5 µg/mL of LPS.
The absorbance of the MTT formazan was determined at 540 nm in an ELISA reader. Cell viability was denoted as the absorbance ratio (expressed as a
percentage) of the test formulation treated cells relative to the untreated vehicle cells. Values are represented as mean ± SEM. RAP: Rapamycin; LPS:
Lipopolysaccharide; Con-A: Concanavalin-A.
3.2. Estimation of TNF-α Expression
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Figure 2. The effect of the test formulation on TNFsecretion in LPS mediated splenocyte cells was measured after 48 hours of treatment. The values are
represented as mean ± SEM. RAP: Rapamycin; LPS: Lipopolysaccharide; Con-A: Concanavalin-A.
3.3. Estimation of IL-1β Expression
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